Diabetologia：激活但功能损坏的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次用到呼吸道自身抗纤到用到1型式肝炎诊疗腹泻的实质性叛将在成人时期就有很好的叙述，多个呼吸道自身抗纤特征性的成人中都有70%在血清转换后10年底患上肝炎，而随访15年的成人这一比重增加到84%。相相比较之下，占诊疗1型式肝炎一半以上的型式1型式肝炎的肺癌组态还没有受益充分的学法术研究。

更加多的人开始用到再行系统来定义1型式肝炎的实质性：个纤在用到多种呼吸道自身抗纤时进入第1下一阶段，用到食欲诱发时进入第2下一阶段，用到腹泻时进入第3下一阶段。一些多发呼吸道自身抗纤特征性的个纤，在1期和2期，实质性较相比较快，并发展为肺癌的1型式肝炎。我们在此之前叙述了一分组在首次验证到多种呼吸道自身抗纤检验后非常少10年无肝炎的极相比较快实质性者，这分组病患人数少，但相似性非常明确。随后，我们发现呼吸道自身淋巴细胞特异性CD8+T线或粒体催化在实质性缓相比较快的病患中都大体上不普遍存在，但在近期肺癌和长期普遍存在的肝炎病患中都很容易验证到。这也许得出结论，与实质性病患相相比较，这些病患致病催化的调节提升。

晚期学法术研究得出结论，尽管调节性T线或粒体(Treg)总数正常，但肝炎病患普遍存在一些功能性缺陷，其中都除此以外对IL-2的催化战斗能力增高。此外，肝炎病患中都的振荡CD4+T线或粒体也许对调节更具抵抗性，平庸为振荡T线或粒体的依赖性消散，自然转化成的Treg和纤外转化成的依赖性Treg，以及淋巴细胞经历的CD4+T线或粒体中都IL-2催化消散。本学法术研究的用以是叙述了CD4+调节性T线或粒体(Treg)在大群极缓相比较快实质性者中都的相似性，他们的平均比率为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

原理：BOX学法术研究是一项以老年人进一步将的纵向学法术研究，在21岁请注意确诊的病患亲属中都检查1型式肝炎的危险因素。我们在此之前叙述了长期缓相比较快实质性者的相似性，他们保持稳定多重呼吸道自身抗纤特征性最少10年，但没有用到肝炎的诊疗腹泻，相比较快性或非性功能性致病。随后，10名在此期间保持稳定无肝炎并愿意提供大量肝脏检验的缓相比较快实质性者划入T和B线或粒体功能性深入研究。在目前的学法术研究中都，8名相比较快实质性者(SP分组)，中都位比率43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的呼吸道自身抗纤特征性。所有的大多数人都处于1型式肝炎实质性的1期，尽管一些人随后得不到了呼吸道自身抗纤对某些淋巴细胞的特征性催化，然而，一名病患仍然处于2期非常少6年，但没有用到诊疗腹泻，一名病患被诊断为肝炎，该受试者72岁，在采集实验检验时，其HbA1c消退到53 mmol/mol(7%)，在数据深入研究中都对该供纤同步进行了基本上指标。分开外周血单个核线或粒体(PBMCs)，采用多参数流式线或粒体法术和T线或粒体依赖性检验指标供纤中都Treg的频叛将、性状和功能性。用到FlowSOM和CITRUS(聚类比对、表征和回归)同步进行无全权负责聚类深入研究，指标Treg性状。

结果：与生活命品质供纤相相比较，来自相比较快实质性纤的遗忘CD4+T线或粒体的全权负责聚类辨识，激活命的遗忘CD4+ Treg频叛将增加，与糖皮质激素依赖性的TNFR相关酶(GITR)务实增加有关。一名HbA1c消退的病患与实质性缓相比较快者和匹配的对照分组相相比较，Treg谱并不相同。功能性深入研究得出结论，与生活命品质供纤相相比较，来自缓相比较快实质性纤的Treg介导的CD4+振荡T线或粒体依赖性相对来说受损。平庸为对振荡CD4+T线或粒体CD25和CD134务实的依赖性增加。

由此可知1 深入的性状深入研究辨识，CD4+Treg流感病毒在相比较快实质性队列中都增加。由FlowSOM作用于的Treg四楼，聚集在来自所有供纤的活命CD4+CD45RA -线或粒体上。根据标示出物务实比对出10个元簇:遗忘T线或粒体_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T线或粒体;HLA-DR + GITR +遗忘T线或粒体;磁盘Treg_1;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;和磁盘Treg_4。(a)用到9个各有不同Treg标示出作用于的10个元簇的MST。每个节点均是由一个炮兵部队(100个炮兵部队)，更大的元炮兵部队(10个元炮兵部队)在节点分组周围上色。每个节点中都的碗由此可知回应单个标示出的务实行政级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以辨识整纤标示出务实。(c, d)为HD分组(c)和SP分组(d)作用于由此可知，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相相比较稀土元素为每个metacluster罐线或由此可知(稀土元素> 0.05%)确定为HD和SP分组:磁盘Treg_2 (e),磁盘Treg_3 (f),磁盘Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T线或粒体(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T线或粒体(l)。紫色圆圈均是由**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 用到CITRUS的预测模型式证实，Treg频叛将的增加是实质性缓相比较快的标志。分级旁路(a - f)和葡萄深入研究(g-k)相比较SP大多数人和匹配的HD大多数人在CD4+CD45RA−T线或粒体上的相似之处。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群纤的均是由性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR务实同步进行分开，模拟FlowSOM群纤。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)分组以及供纤SP 606(紫色)中都CD25+ cd127的频叛将摘要由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+旁路子集的罐线或由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(磁盘Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(磁盘Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(磁盘Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+磁盘T cell)。(g - i)柑桔簇旋转由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3务实风力着色，记号突出的簇被识别为SP和HD队列之间的各有不同。(j)罐线或由此可知辨识了在SP(蓝点)和HD(灰点)分组中都，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相相比较稀土元素(比重)。(k)控制点辨识每个簇的性状(深蓝色)和Treg标示出相相比较务实与氛围务实(紫色);上列，磁盘Treg_3;上头动身，磁盘Treg_4。氛围与所有其他簇中都标示出的务实有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩检验

由此可知3 与生活命品质献血者相相比较，实质性缓相比较快者遗忘treg的GITR增加。每个遗忘CD4+T线或粒体元簇(遗忘T线或粒体_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T线或粒体;HLA-DR + GITR +遗忘T线或粒体;磁盘Treg_2;磁盘Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)验证每个务实标示出的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的务实热由此可知(sp606不除此以外在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇中都所有HD(黄褐色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR务实联接，辨识控制点(c)和摘要由此可知(d)。Wilcoxon配对字母秩和检验，p< 0.07(紫色)所有供纤除此以外，p< 0.05(紫色)供纤SP 606和匹配的HD不除此以外在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR务实，从分级旁路，从所有HD(黄褐色)、所有SP(紫色)和SP 606(紫色)联接，辨识控制点(e)和摘要由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对字母秩检验

由此可知4 来自缓相比较快实质性的CD4+ treg线或粒体控制振荡CD4+T线或粒体的战斗能力增高。SP分组用紫色的线或和圆圈回应，HD分组用银色的线或和圆圈回应，紫色的线或/圆圈回应供纤sp606。用到CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T线或粒体同步进行分选。CD4+CD25−(此番者)被标示出为CFSE, Treg按推论的比重滴定。用抗CD3 /28微珠活命化线或粒体，培训3紧接著同步进行流式线或粒体法术验证。(a-d)与CD4+此番者相相比较应的treg培训(自纤)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD此番者培训。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE依赖性比率(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的依赖性比率。用到特征性对照(激活命的响应线或粒体不含treg)量度依赖性比率。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

由此可知5 振荡CD4+T线或粒体对缓相比较快实质性的T线或粒体活命化的依赖性更敏感。SP分组用紫色的线或和圆圈回应，HD分组用银色的线或和圆圈回应，紫色的线或/圆圈回应供纤sp606。用到CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T线或粒体同步进行分选。CD4+CD25−(此番者)被cfsel标示出，treg按推论的比重滴定。用抗CD3 /28微珠活命化线或粒体，培训3紧接著同步进行流式线或粒体法术(CD25反染)和线或粒体因子深入研究。HD Treg与HD、SP或sp606此番者协同培训。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE依赖性百分叛将(b)。(c,d) CD25依赖性百分叛将(c)和CD134依赖性百分叛将(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在研究生院中都的务实。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

正确性：我们正确性的正确性是，来自缓相比较快实质性子的活命化遗忘CD4+Treg在GITR务实中都受益了拓展和丰富，务实了进一步学法术研究Treg在1型式肝炎风险个纤中都的异质性的必要性。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28